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高分辨類器(qì)官組織微環境制備及檢測系統湖資

創新性的微米級别的類器(qì)官組織微環境制備

用非接觸、無掩膜的光學蝕刻方法制備細胞模電個型

具有高分辨(去卷積後120nm)的共聚焦檢測

适合類器(qì)官、類器(qì)官芯片等應用


詳情

産品概況

      &又說nbsp;如(rú)何制備出具有可控性和重複性的類器(qì)官模型,以便更有效匠銀的進行活細胞和疾病研究,一直是生物學家(jiā)進行會暗類器(qì)官研究所面臨的巨大(dà)挑戰之一。

     讀做  法國Alvéole的PRIMO是創新性定制細山新胞模型的工(gōng)具,能在微米級别的尺度下,用非接觸腦男、無掩膜的光學蝕刻方法制備細胞模型、以具有超高靈活度和再現性的生物工(gōng們計)程手段實現體外微環境的定制,同時(shí)可對其機械力學和生化特性進行他生設計微調,具有高度的靈活性、可控性和可重複性。選擇電腦中任意一張圖案,P坐兵RIMO都能将它投射到細胞培養基質上,利用非接觸式、無掩模的光刻科習技術,在軟件和光敏試劑的幫助下獲得(de)任意圖案的2D蛋白塗層或3D水凝車就膠或微流控結構,可用于類器(qì)官和類科畫器(qì)官芯片的制備。

       好能 高分辨類器(qì)官組織微環境制備及檢測系統可以對以上建立的類器(qì)學雨官及細胞模型進行快速3D切片式高分辨共聚焦成像觀察,都員并進行長(cháng)時(shí)間活細胞成像觀察。

        目前新小PRIMO系統在全球用戶110+。


原理圖.jpg


産品原理

用表面蛋白塗層(Micropatterning)、水凝膠建構(St上去ructuration of Hydrogel)、作科微流道建構(Microfabrication)方法設計類器(qì)官細胞影是模型和類器(qì)官芯片,用高分辨重掃共聚什學焦技術進行類器(qì)官細胞模型和類器(qì)刀生官芯片的觀察和檢測。參考PRIMO原理和RCM原理。


産品特點

1、步驟簡單:四步可完成:計算機圖案設計、用UV光蝕刻構建還音基質結構、種蛋白進行基質功能化、将細胞接種到定制好(hǎo)的微環境南件中。

2、高靈活性:可按照任意圖案去構建基質和/或使其功能化,不(bù)限兵門圖案的大(dà)小(xiǎo)和複雜程度,隻需軟件操作即可靈活改變圖微女案,從而生成不(bù)同的細胞模型。

3、非接觸式、無掩模UV投射:可靈活控制UV的照射強度、相志照射時(shí)間和照射區域對基質進行蝕刻、切割和我可固化。可以實時(shí)觀看蝕刻過程,及時(shí)會著調整和優化實驗條件。

4、适用于多種基質:用戶可以使用任意一個常規的細胞基質:可以是扁音風平的,也可以是帶有微結構的,可以是堅硬的也可以是柔軟的,如(rú):玻船行璃蓋玻片、塑料培養皿、聚二甲基矽氧烷(PDMS)、聚苯乙烯、水凝膠(PEG丙烯湖說酸酯、聚丙烯酰胺凝膠、瓊脂、基質膠)、光刻膠,等。

5、适合多種蛋白:PRIMO的客戶日常使用超過10種的各類蛋白:Fi朋到brinogen-488, Fibrino行紅gen-647, Fibronectin, GFP, Neutravidin輛紙-488, Neutravidin-647銀動, PLL-PEG-Biotin, Protein A-647, Stre樂不ptavidin, 初級和次級抗體,等。

6、蝕刻高分辨率:全視野分辨率為(wèi)1空音.2µm( 500×300µm ,20倍物鏡)。

7、多層次:可蝕刻256個灰階層次,粘附不(bù)同密度公黃層次的蛋白。

8、多種蛋白:可應用3種不(bù)同蛋白(根時東據實驗需求),可從用戶日常使用的10多種蛋白質中選取。

9、自動對齊:自動進行檢測和圖案定位,如(rú)自動對齊于微結構或者微高裡圖案上。

10、蝕刻速度快:完成整個視野中的圖案(500×300µm,20倍物鏡),僅湖海需0.5s。

11、高分辨率共聚焦3D成像。

12、更高的橫向分辨率:成像分辨率提升1.4倍,重掃後達到超分辨率170nm,影門重掃+去卷積可達到120nm。圖像更銳利,細節更明顯。

13、更高的靈敏度:信噪比提升4倍,增加系統靈敏度,微弱熒光強度的圖像姐不也可獲取。

14、可做長(cháng)時(shí)間活細胞成像:樣本平面的激光僅有務線nano-watt等級,光毒性和光漂白性極弱,适合做長(cháng)時(兵志shí)間活細胞成像。

15、改進3D切片成像功能:可用于多層掃描及3D影像構建。

16、掃描速度:圖像大(dà)小(xiǎo)為(wèi)51跳吃2x512像素時(shí)為(wèi)2 fps(每秒2幀),一般掃通草描為(wèi)5 fps(每秒5幀),最快可達到10 fps(每秒10幀店謝)。

17、用戶友好(hǎo)型操作模式:短(duǎn門銀)時(shí)間培訓即可操作。


産品應用

類器(qì)官應用:

1、 PRIMO可以通(tōng)過水凝膠結構化創建具有3D支撐作用的基質結構姐訊,再加上類器(qì)官發育所必需的各種細胞生長(cháng快雨)因子(zǐ),将多能誘導幹細胞或胚胎幹細胞培養形成具有三維立體結銀和構的各種類器(qì)官進行功能性研究。

2、 PRIMO可以将來自于患者的原代腫瘤細胞培養成議金更接近于體内形态的腫瘤球,進行抗腫瘤藥理實驗。

3、 PRIMO還可以通(tōng)過構建類器(qì)官芯片,創造3D微海物結構,進行多種細胞的共培養,在體外模拟多個細胞相互作用的請請體内運行。


其他(tā)所有研究細胞與微環境作用的領域。如(鐘作rú):

1、2D細胞微環境建構,研究如(rú)細胞遷移/趨觸性、細胞黏附、門自細胞力學、細胞标準化培養、電鏡的标準化細胞觀察等。

2、3D細胞微環境建構,研究如(rú)細胞球培養、類器(外低qì)官、組織工(gōng)程等。

3、微流體芯片制作,研究如(rú)類器(qì)官芯片、讀司細胞流體力學研究、小(xiǎo)分子(zǐ)擴散研究等。

 

觀察成像:

1、對以上建立的細胞模型進行快速3D切片式高分辨共聚焦成就飛像觀察,可以進行長(cháng)時(sh這開í)間活細胞成像觀察。

2、活細胞運動快速成像。

3、内質網快速成像,防止熒光淬滅。

4、其他(tā)快速高分辨共聚焦應用等。


應用展示

1、非粘附性基質的細胞球标準化培養

下圖:上圖:光聚合的PEG水凝膠(4-arm-PEG-acryl hy看要drogel)槽内的HEK細胞球。

下左圖,下中圖:共聚焦熒光顯微圖像,PEG水凝膠槽内的小(xiǎo)球體和雙裡金球體。


6、細胞球培養.png


PRIMO作用:細胞球是細胞的聚集,可以作為(wèi)生理模型或複雜類器(qì)官的起始模型。年照非粘附性水凝膠基質固化形成微孔,細胞種植其中形成細志明胞球,可形成多種細胞共培養、由多種蛋白調控的3D組織類器(q去作ì)官模型。


2、粘附性基質的細胞培養

下圖:PEG水凝膠通(tōng)過聚合形成特定形北上狀,然後用交聯分子(zǐ)的方法進行裝飾,允許COS-7細胞在這朋習些結構中生長(cháng),以模拟毛細血管(上圖)和小(xiǎo)腸絨毛(下圖)。中列:Z軸顔色編碼的共聚焦熒光顯微鏡圖像,顯輛山示COS-7細胞種植在凝膠上,肌動蛋白染色。右列:Z視雜軸用3色最大(dà)化投影顯示的共聚焦熒光顯微圖像,顯示構成圖像的很街分子(zǐ)(紅色),肌動蛋白細胞骨架(讀白綠色)和核膜(藍色)。


7、粘附性基質培養.png


PRIMO作用:混合其他(tā)水凝膠,形成粘附性基質,通(tōng有訊)過光固化和光剪切,使UV敏感的水凝膠形成特定形狀,表面進行功能城文化,再種植細胞。


3、修飾水凝膠結構

下圖:修飾水凝膠結構的原理示意圖


8、水凝膠結構修飾-1.png


下圖:藍色為(wèi)水凝膠,紅色為(wèi)黏附能車的纖維連接蛋白(fibronectin)慢近。中間和右側為(wèi)共聚焦圖像。


8、水凝膠結構修飾-2.png


PRIMO的作用:混合惰性水凝膠和其他(tā)水凝膠,形成粘附木視性基質,或改造惰性水凝膠成為(wèi)粘附性基質,再通(tōn風要g)過光固化和光剪切,使UV敏感的水凝膠形成特定形狀,長和表面進行功能化,再種植細胞,可創造不(bù)同的細胞模型,可形成以水凝膠為(wèi)骨架,多種細胞共培養、由多種蛋白調控的3D組織類器(費業qì)官模型。


4、用微制造設計“類器(qì)官芯片”(微流控芯片)

下圖:用微制造(Microfabricatio飛刀n)設計“類器(qì)官芯片”(微流控芯片),研究者将不(b電習ù)同類型的細胞注射到芯片的不(bù)同民筆的腔室/管道裡,以重現造血幹細胞的微生态環境:頂部腔室裡的成骨細鐵我胞模拟骨骼成分,底部腔室裡的HUVEC細胞模拟血管窗身成分,造血幹細胞被注射進入中間的通(tōng)道。


9、微流控芯片制備.png


PRIMO作用:設計“類器(qì)官芯片”,創造共培養微環兵員境,在體外模拟多個細胞相互作用的體内運行。


Video

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