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快速類器(qì)官組織微環境制備及檢測系統

創新性的微米級别的類器(qì)官組織微環境制備

用非接觸、無掩膜的光學蝕刻方法制備細胞模型

具有快速(25fps)和深度成像的共聚焦檢測

适合類器(qì)官、類器(qì)官芯片等應用


詳情

産品概況

       如(rú)何制備新訊出具有可控性和重複性的類器(qì)官模型,以便更有效的議時進行活細胞和疾病研究,一直是生物學家(jiā)進行類器(qì)官研究所面線爸臨的巨大(dà)挑戰之一。

      照東  法國Alvéole的PRIMO是創新性定制細紅動胞模型的工(gōng)具,能在微米級别的尺度下,用非接觸、無掩膜的光學蝕新家刻方法制備細胞模型、以具有超高靈活度和再現性的生物工(gō媽個ng)程手段實現體外微環境的定制,同時(shí)可對其機械力學和生可討化特性進行設計微調,具有高度的靈活性、可控性和可重複性雜車。選擇電腦中任意一張圖案,PRIMO都能将它投射到細胞培養行章基質上,利用非接觸式、無掩模的光刻技術,在軟件鐵低和光敏試劑的幫助下獲得(de)任意圖案的2D蛋白塗層或3D水凝膠著相或微流控結構,可用于類器(qì)官和類器(qì)官芯片的制備。

      &nb低海sp;  快速類器(qì)官組織歌媽微環境制備及檢測系統可以對以上建立的類器(qì)官及細胞模型進行快速3D切大那片式共聚焦成像觀察,并進行長(cháng)時(shí)間活細胞成像觀察。如厭

        &nbs關筆p;目前PRIMO系統在全球用戶110+。


原理圖.jpg


産品原理

用表面蛋白塗層(Micropattern那綠ing)、水凝膠建構(Structurat河聽ion of Hydrogel)、微流道建構(Microfabricati很飛on)方法設計類器(qì)官細胞模型和類器(qì)窗購官芯片,用快速深度3D共聚焦技術進行類器(qì)官細胞模型和類器(qì)官芯片房間的觀察和檢測。參考PRIMO原理和NL5原理。


産品特點

1、步驟簡單:四步可完成:計算機圖案設計、用UV光蝕刻構建基質結構、種蛋白進風黃行基質功能化、将細胞接種到定制好(hǎo)的微環境中。

2、高靈活性:可按照任意圖案去構建基質和/或使其功能化,不(bù)限圖案的大(業和dà)小(xiǎo)和複雜程度,隻需軟件操作即可靈活改刀我變圖案,從而生成不(bù)同的細胞模型。

3、非接觸式、無掩模UV投射:可靈活控制UV的照射強輛討度、照射時(shí)間和照射區域對基質進行蝕刻拿相、切割和固化。可以實時(shí)觀看蝕刻過程,及時(shí)調整輛匠和優化實驗條件。

4、适用于多種基質:用戶可以使用任意一個常規的細胞基質:可老電以是扁平的,也可以是帶有微結構的,可以是堅硬的也可以筆土是柔軟的,如(rú):玻璃蓋玻片、塑料培養皿、聚二甲基矽氧烷(PDMS)、聚一民苯乙烯、水凝膠(PEG丙烯酸酯、聚丙烯酰黑明胺凝膠、瓊脂、基質膠)、光刻膠,等。

5、适合多種蛋白:PRIMO的客戶日常使用超過10種的各類蛋白:Fibr學遠inogen-488, Fibrinogen-自視647, Fibronectin, GFP, Neutravidin-4會短88, Neutravidin-647,是商 PLL-PEG-Biotin, Protein 兵好A-647, Streptavidin, 初級和次個校級抗體,等。

6、蝕刻高分辨率:全視野分辨率為(wèi)1.2µm( 500×300µm ,樂朋20倍物鏡)。

7、多層次:可蝕刻256個灰階層次,粘附不(bù)同密度層次的蛋白。

8、多種蛋白:可應用3種不(bù)同蛋白(根據資電實驗需求),可從用戶日常使用的10多種蛋白質中選取。

9、自動對齊:自動進行檢測和圖案定位,如(rú)自上務動對齊于微結構或者微圖案上。

10、蝕刻速度快:完成整個視野中的圖案(500×300µm,20倍物鏡)雨呢,僅需0.5s。

11、快速深度3D活細胞共聚焦成像,可進行多層掃描及3D資可影像構建。

12、在深度3D成像領域,比轉盤式共聚焦的分辨率更高,成像亮度是轉盤式共聚低匠焦的16倍。

13、沒有轉盤式共聚焦的針孔串擾(pinhole cross船畫-talk)現象。

14、實時(shí)成像分辨率達到170nm(店很去卷積後)。

15、更大(dà)的成像視野:12.7×12.7mm。

16、具有極快的掃描成像速度:25fps(每秒25幀),20弟什48×2048。

17、靈敏度極高,量子(zǐ)效率(QE)達到95作吧%。

18、低(dī)光毒性和光漂白性,适合長票拍(cháng)時(shí)間成像。

19、用戶友好(hǎo)型操作模式:短(duǎn)時(shí亮雪)間培訓即可操作。


産品應用

類器(qì)官應用:

1、PRIMO可以通(tōng)過水凝膠結構化創建具有3D支撐作用的基冷但質結構,再加上類器(qì)官發育所必需的各種化歌細胞生長(cháng)因子(zǐ),将多能誘導幹細胞或胚胎幹細胞培算務養形成具有三維立體結構的各種類器(qì)官進行功能性林老研究。

2、PRIMO可以将來自于患者的原代腫瘤細胞培養成更接近于體内形态請謝的腫瘤球,進行抗腫瘤藥理實驗。

3、PRIMO還可以通(tōng)過構建類器(q又著ì)官芯片,創造3D微結構,進行多種細胞的共培自劇養,在體外模拟多個細胞相互作用的體内運行。


其他(tā)所有研究細胞與微環境作用的領域。如(rú):

1、2D細胞微環境建構,研究如(rú)細胞遷移/趨觸性、鄉還細胞黏附、細胞力學、細胞标準化培養、電鏡的标準化細胞觀察等。

2、3D細胞微環境建構,研究如(rú)細胞球培養、類器綠房(qì)官、組織工(gōng)程等。

3、微流體芯片制作,研究如(rú)類器(qì)官芯片、細胞流體力學研究、小(x筆西iǎo)分子(zǐ)擴散研究等。

 

觀察成像:

1、對以上建立的細胞模型進行快速深度3D切片式共聚焦成像觀察,她車可以進行長(cháng)時(shí)間活細胞成像觀察。

2、活細胞運動快速成像。

3、内質網快速成像,防止熒光淬滅。

4、其他(tā)快速深度共聚焦應用等。


應用展示

1、非粘附性基質的細胞球标準化培養

下圖:上圖:光聚合的PEG水凝膠(4-arm-PEG-acryl h廠信ydrogel)槽内的HEK細胞球。

下左圖,下中圖:共聚焦熒光顯微圖像,PEG水凝膠槽離刀内的小(xiǎo)球體和雙球體。


6、細胞球培養.png


PRIMO作用:細胞球是細胞的聚集,可以作為(wèi)生理模型或複雜類器(qì)官的起黑議始模型。非粘附性水凝膠基質固化形成微孔,細胞種植其中形成細胞球,可形成多種細胞共培養、由多種蛋白調控的3D組織你船類器(qì)官模型。


2、粘附性基質的細胞培養

下圖:PEG水凝膠通(tōng)過聚合形成特定形狀,然後用交聯分子(z鄉舞ǐ)的方法進行裝飾,允許COS-7細胞在這些結構中生長(cháng),以模拟毛細血管(上圖)和小(xiǎo)腸絨毛(下圖)。中列:Z軸顔色編碼的共聚焦熒光顯微鏡圖像,顯示COS-商熱7細胞種植在凝膠上,肌動蛋白染色。右列:Z軸用3色最大看銀(dà)化投影顯示的共聚焦熒光顯微圖像,顯示纖連蛋白(紅色),肌頻歌動蛋白細胞骨架(綠色)和核膜(藍色)。


7、粘附性基質培養.png


PRIMO作用:混合其他(tā)水凝膠,形成粘附土媽性基質,通(tōng)過光固化和光剪切,使地作UV敏感的水凝膠形成特定形狀,表面進行功能化,再種植細胞空大。


3、修飾水凝膠結構

下圖:修飾水凝膠結構的原理示意圖


8、水凝膠結構修飾-1.png


下圖:藍色為(wèi)水凝膠,紅色為(wèi)黏附的纖維連接蛋白有新(fibronectin)。中間和右側為(wèi)共聚焦圖像。


8、水凝膠結構修飾-2.png


PRIMO的作用:混合惰性水凝膠和其他(tā)水凝膠電低,形成粘附性基質,或改造惰性水凝膠成為(wèi)粘附性基質,再通(tōng)木明過光固化和光剪切,使UV敏感的水凝膠形成特定形狀,表面進行功能化,再種植細胞,少東可創造不(bù)同的細胞模型,可形成以水凝膠為(wèi)骨架,多種細胞共培養門化、由多種蛋白調控的3D組織類器(qì)官模型。


4、用微制造設計“類器(qì)官芯片”(微流控跳書芯片)

下圖:用微制造(Microfabrication)設計“類從從器(qì)官芯片”(微流控芯片),研究者将不(bù)同類型的細胞注射到芯些木片的不(bù)同的腔室/管道裡,以重現造血幹細胞的微來數生态環境:頂部腔室裡的成骨細胞模拟骨骼成分藍也,底部腔室裡的HUVEC細胞模拟血管成分,造血幹細胞被注射進入中間的算小通(tōng)道。


9、微流控芯片制備.png


PRIMO作用:設計“類器(qì)官芯片”,創造共培養微環境,在體外模拟多個細胞相互麗懂作用的體内運行。


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