Livecyte 實時(shí)細胞功能及單秒站細胞行為(wèi)分析系統
采用“疊層衍射定量相位成像技術”
得(de)到媲美熒光的高對比度無标記圖像
對數千個單顆細胞進行自動識别、跟蹤和定量
同時(shí)得(de)到細胞群和單個細胞的街熱長(cháng)時(shí)間實時(shí)動态數據制從
自帶培養腔,可以做長(cháng)時(shí)間活細懂慢胞實時(shí)成像
詳情
産品原理
“疊層衍射技術”:L都拍ivecyte采用“疊層衍射定量相位成像技術”(Ptychograph市下ic Quantitative Phase Ima都煙ging,Ptychographic QPI):即采用計算成像方法,利用虛拟弟術透鏡(The Phasefocus Virtual Len理了s™)捕獲衍射光波形成的相對相位偏移信息。同藍湖一個樣本可以得(de)到一系列衍射圖像,疊加在微街一起,通(tōng)過計算機重組生成高對比度的細胞圖像。
“疊熱很層衍射技術”原理示意圖:
頻拿 “疊層衍射技術”在透射光和反射光應用中都有極佳線也的表現。當提供合适的照明光源和檢測器(qì)時(shí),它可以利用電磁媽學光譜中的任意波長(cháng)的光線進行成像,包括電子(zǐ)和其他(t兵林ā)粒子(zǐ)波,甚至是聲波。Livecyte就采用這種技術來捕黃雜獲相對的相位偏移信息,在無熒光标記和無高身師功率照明光源的情況下,生成活細胞的高對比度圖像和視頻。适用于最敏感的活細民睡胞(如(rú)幹細胞、異質性的原代腫瘤細胞、神經細胞等有大)的長(cháng)期成像(長(cháng)達數周)。與傳統的相差成像不(bù事厭)同,Livecyte得(de)到的非标記QPI圖像海線與熒光圖像類似,有極佳的對比度,如(rú制知)明亮的細胞影像和深色的背景(下圖)。與基于群體的成像技術不(訊放bù)同,Livecyte可以自動分辨、跟蹤時(sh舊河í)序成像中的每顆單細胞,得(de)到每顆單細胞随時(shí)間在形拿唱态、行為(wèi)、幹物質(dry mass)等指标上公業的變化,對單細胞進行識别和表征,從而得(志女de)到每顆單細胞的完整的表型數據。
&nbs事女p; Livecyte疊層衍射成像可實現媲美熒光的無下腦标記高對比成像:
産品總述
英國Ph輛懂asefocus公司的Livecyte“實時(shí)細胞功能及單細胞行為(w民歌èi)分析系統”采用“疊層衍射實時(shí)定量成像技術”(Ptychogra歌船phic QPI),可以在無标記、無高光毒性激光照射的情況下音媽,産生高對比度、無僞影、可定量、高保真度的細胞圖像匠和,并對單個細胞進行自動識别、跟蹤和定量,同時(shí)得(de)又作到細胞群和單個細胞的長(cháng)時(shí)間實時不水(shí)動态數據。
Livecyte側重于司會細胞的非标記成像和單細胞特性的記錄,如(rú)有懂在非标記狀态下研究細胞在增殖、分裂、凋亡、分化、遷移等現象過程拍兒中的形态學變化和運動行為(wèi)的變化,年腦得(de)到形态學指标(如(rú)單個細胞的面積、球形度、幹物質量等)在的和運動學指标(如(rú)單個細胞遷徙速度、方向、位移、軌迹等)。可進爸煙行無标記識别分析細胞群、細胞譜系等研究。除了非标記疊層衍爸線射實時(shí)定量成像,還可做明場和多通(tōng)道(1錯錯-7通(tōng)道)熒光成像。自帶培養腔,可以做長(cháng)時(shí吧可)間活細胞實時(shí)成像。
廠鄉又家(jiā)Phasefocus在2013年因“疊層衍射實時(shí作兒)定量成像技術”被授予“Microscopy Today Inn媽跳ovation Award”,并且Livecyte儀器技又(qì)在2017年又再獲此殊榮。
産品特點
無标記衍射成像:
1. 比起明場、相在個差成像,Livecyte疊層衍射成像可實現媲美熒光的無标記高對比成像;
2. 無熒光标記下,對細胞傷害更小(xiǎ海時o),适用于幹細胞、神經細胞及原代細胞等下門較脆弱的細胞;
3. 如(rú)有需要,也可搭配最多七少如種熒光成像。
獨特數據庫與大(dà)數據篩選分析:銀我
1. 獨特數據展示與呈現,實驗結果一目了然;兵看
2. 可以實現多參數、多數據間的大(dà)數據篩選與比很能較,找出單一參數無法發現的細胞行為(wèi);
3. 多種類數據輸出(原始數值、術朋圖像、影片、單細胞分割檔案),可用第三方軟件做靈活分析。
自動化單細胞分析+幹物質量分析:
1. 可實現自動化分析,根據關河形态學和行為(wèi)學特征對每顆細胞創建獨特的“表型指紋”,省去繁複耗時東對(shí)的人工(gōng)圈選步驟;
2. 可實現精确的場站單細胞分割、單細胞定量,得(de)到每顆細胞些地的多種參數進行分析,其他(tā)産品少有可做到;間土
3. 多種參數及定量化信息一民:如(rú):細胞彙合度、個數、單個細胞面積輛東、厚度、幹物質量(Dry Mass)、球形度、長(chán民這g)寬比、周長(cháng)、移動速度、瞬視算時(shí)移動速度、移動方向、遷移蜿蜒指數(Meandering Index習人)、限制比率(Confinement Ratio)、位移、分裂指數、倍增時(商喝shí)間,等。
4. 可做獨特的幹物質量(Dry Ma飛門ss)分析、無标記細胞譜系示蹤分析、無标記細胞共培養分析,其場有他(tā)産品少有可做到。
細胞無标記時(shí)生長(cháng)更好(hǎ見都o):
細胞譜系分析視頻:
廣泛的應用領域
Livecyte适用于細胞增殖、細胞毒性、細胞分裂、細胞吞噬、血管新生姐信、劃痕遷移、趨化運動、細胞運動、T細胞殺傷、細胞吃明譜系研究、細胞共培養、單細胞研究等多個研究領域,尤其是無标記敏感細胞(原代細腦跳胞、幹細胞、神經細胞)分析。
Livecyte應用展示。
1、 細胞增殖:獲得(de)細胞個數、細胞面積、細胞幹物質的變化曲相高線、倍增時(shí)間等數據;
2、 細胞形态:獲得(de)每顆細胞及群友年體細胞的球形度、周長(cháng)、長(cháng)寬比、面積、厚度老亮等數據;
3、 細胞有絲分裂:獲得(de)發生有絲分裂細胞的比例,有絲麗費分裂的時(shí)間,分裂的細胞總數等數據;
4、 細胞生長(cháng):獲得(de)每顆細胞幹物質,這個幹暗多物質是除去水之外的所有細胞成分(如(rú)蛋白質、脂質、碳水說紙化合物、DNA等生物分子(zǐ))的總質量;
5、 細胞運動:獲得(de)每顆細胞運動的軌迹、速度、方向、角度、位移、路徑等地房數據;
6、 T細胞殺傷:獲得(de)效應細胞與靶細胞的接樂湖觸時(shí)間,靶細胞上有幾顆效應細胞、效應細胞與靶細胞的命運等數據年聽;
7、 細胞譜系:可以追溯每顆細胞的來源,輸出譜系圖,對研究細胞坐靜的異質性有很好(hǎo)的指導。
可以通(tōng)過30多種參數進行流式分群分析,洞察更多的細胞功能。
應用展示
1、無标記共培養研究
下圖說(shuō)明:用 Livecyte 無标記區分共培養的信個細胞亞群(原代前列腺癌混合細胞群 vs. TA細胞亞 群 vs. 她歌CB 細胞亞群)。對比了三個群的不(bù)同參數:細胞速度、遷移蜿女習蜒指數(Meandering index)、細胞面積、細胞長(cháng)寬司水比、細胞幹物質量(Dry mass)、細胞球形度(Sphericity)低子。
無标記神經細胞共培養
下圖說(shuō)明:Livecyte可分析細胞平均亮度與亮度分布,了做無标記下區分星狀細胞、神經細胞及微膠細胞,分群後做單細胞分析。
2、細胞譜系研究
可無标記跟蹤細胞的增殖、分裂、傳代、分化、死亡,得(de)到細胞的傳代譜系圖,志是尤其适合敏感細胞的譜系研究(如(rú)原代細胞、神經細胞、幹細胞)和幹細音快胞的發育分化研究。
下圖說(shuō)明:對同一個癌細胞群裡的不(bù)同區歌細胞進行譜系研究,自動進行單個細胞識别(左圖)。右上圖:幹物質量(Dr資媽y Mass)顯示細胞的生長(cháng)和分裂,綠色标記細胞(Cell 1)費報和橘色标記細胞(Cell 2)都在同樣的幹物得林質量下分裂,但每代中綠色标記細胞(Cell 2)生長(c紅就háng)更快、分裂周期更短(duǎn)。右下東說圖:細胞的譜系樹,表示從初始單個細胞生長(cháng)分工土裂成一群細胞。
下圖說(shuō)明:捕捉“罕見事件”:細胞9在第1次分裂後迅速融合(F錯間usion),表現為(wèi)幹物質量加倍;融合後的細胞繼續些和增殖,然後進行第2次和第3次分裂;細胞幹物質量一直比腦匠普通(tōng)細胞大(dà)。
細胞譜系分析視頻:
3、劃痕遷移研究
對單細胞的自動識别、跟蹤和定量分析可以提供深入的“劃痕遷移”到媽的指标,如(rú)細胞運動速度、運動方向動內和有絲分裂指數,可區分細胞運動和細胞增殖對“劃痕愈合”的影響,克服基于“鐵還彙合度”研究“劃痕愈合”的傳統研究方法的局限性。
下圖說(shuō)明:Livecyte可自動問快識别和跟蹤單個細胞,直接檢測細胞的運動;可區分細胞日些運動和細胞增殖對“劃痕愈合”的影響。
劃痕遷移分析視頻:
4、脂肪細胞分析
下圖說(shuō)明:可以看到細胞内的一顆一顆高亮度的脂肪顆粒,脂肪顆粒水近可被分割并定量,計算脂肪顆粒數目和幹物質量。
5、細胞毒性分析
下圖說(shuō)明:研究細胞的凋亡和毒性
細胞毒性視頻:
6、血管生成分析
下圖說(shuō)明:可研究血管細胞形成的血管網明拿絡,研究其中的單細胞行為(wèi)變化。
血管生成視頻:
7、腫瘤球分析
可分析藥物作用下,腫瘤球的周長(cháng)、面積的定量變化。
腫瘤球成像視頻:
8、T細胞殺傷研究
T細胞殺傷實驗能在體外研究工(gōng)程T細胞殺傷靶腫瘤的功效兒能。Livecyte的T細胞殺傷實驗可以提供更多的細節來确定效應T細胞和靶細胞城爸之間的相互作用動力學,可以從單個細胞着手,自動監測和量化效應細胞與靶細胞的總的身服接觸時(shí)間,靶細胞凋亡前的最後一次接觸時(shí吃窗)間、靶細胞上有幾顆效應細胞、效應細胞與靶細胞的命運影們等數據。
0hr和24hr的疊層衍射定量相位成像(鐵弟QPI)和熒光成像示例如(rú)下圖,T細胞無标記件答,活的靶細胞為(wèi)紅色熒光标記,凋亡靶細胞為(w銀藍èi)綠色熒光标記,第三列數據說(shuō)明T細胞殺傷靶細胞的程度最為場明顯:
Dashboard軟件得(de)到的靶細胞接觸的T細胞的數目、分著累積T細胞接觸時(shí)長(cháng)和平均T細胞接觸時(sh裡一í)長(cháng)如(rú)下圖:
T-細胞殺傷視頻: